要控制實驗室的無菌環(huán)境，可以遵循以下步驟和要點，以確保實驗環(huán)境的無菌性和實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性：

一、無菌室的設(shè)計與管理

1. 無菌室的要求：

• 無菌室應(yīng)矮小、平整，高2.2~2.3米，內(nèi)部裝修應(yīng)平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，便于擦洗及殺菌。

• 無菌室周圍需設(shè)緩沖走廊，走廊旁再設(shè)緩沖間，其面積可小于無菌室。

• 無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設(shè)有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，殺菌紫外燈離工作臺以1米為宜，其電源開關(guān)均應(yīng)設(shè)在室外。

• 無菌室與緩沖間進(jìn)出口應(yīng)設(shè)拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應(yīng)錯開，以免空氣對流造成污染。

2. 建立管理制度：

• 制定并遵守?zé)o菌室管理制度，確保所有進(jìn)入無菌室的人員都了解并遵循相關(guān)規(guī)定。

二、無菌室的潔凈度要求

1. 環(huán)境潔凈度：

• 無菌操作間應(yīng)滿足相應(yīng)潔凈級別的操作環(huán)境，環(huán)境應(yīng)符合萬級潔凈度要求。具體標(biāo)準(zhǔn)為每立方米直徑大于等于0.5微米的塵埃粒子數(shù)應(yīng)小于等于350000個，30分鐘塵降菌落數(shù)小于等于3cfu/立方米。

• 無菌室的空間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級，但操作區(qū)域如超凈工作臺、生物安全柜里需要達(dá)到潔凈度100級。

2. 定期檢測：

• 對于無菌室的潔凈度，應(yīng)定期進(jìn)行檢測，以確保其始終滿足實驗要求。

三、無菌實驗流程

1. 實驗前準(zhǔn)備：

• 對實驗臺、手、檢驗用具進(jìn)行消毒，確保無菌環(huán)境和無菌實驗用品。

• 防護(hù)衣服、口罩、手套等必須佩帶，以減少微生物污染的風(fēng)險。

2. 實驗操作：

• 在進(jìn)行接種或向培養(yǎng)皿內(nèi)倒培養(yǎng)基時，試管口或瓶壁外面不要接觸皿底，試管或瓶口應(yīng)傾斜一下在火焰上通過，以減少污染的風(fēng)險。

四、物品消毒

1. 物品消毒：

• 所有進(jìn)入無菌環(huán)境的物品都必須經(jīng)過嚴(yán)格的消毒處理，包括實驗用具、培養(yǎng)基、檢驗樣品等。

五、其他措施

1. 空氣流通：

• 無菌室內(nèi)應(yīng)保持良好的空氣流通，避免空氣死角，減少微生物滋生的機會。

2. 紫外線照射：

• 定期使用紫外線燈對無菌室進(jìn)行照射消毒，以殺滅空氣中的微生物。

3. 使用無菌技術(shù)：

• 在實驗操作過程中，應(yīng)使用無菌技術(shù)，如無菌稱樣、無菌接種等，以防止微生物的污染。

4. 定期清潔與消毒：

• 定期對無菌室進(jìn)行清潔和消毒，包括地面、墻面、天花板、設(shè)備表面等，以保持其無菌狀態(tài)。

通過遵循以上步驟和要點，可以有效地控制實驗室的無菌環(huán)境，確保實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。